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Título : Determinación de la actividad inhibitoria de la fracción alcaloidal de Phaedranassa brevifolia, sobre las enzimas acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa.
Autor : Robles Jaramillo, Jessica Lissette
Director(es): Acosta León, Karen
Tribunal (Tesis): Vinueza Tapia, Diego
Palabras claves : BIOQUÍMICA;FITOQUÍMICA;BULBO (Phaedranassa brevifolia);ALCALOIDES;GALANTAMINA;ALZHEIMER (ENFERMEDAD);COLINESTERASA;ACTIVIDAD INHIBITORIA;AMARYLLIDACEAE
Fecha de publicación : 1-feb-2019
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Robles Jaramillo, Jessica Lissette. (2019). Determinación de la actividad inhibitoria de la fracción alcaloidal de Phaedranassa brevifolia, sobre las enzimas acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFC;56T00859
Abstract : The objective of the present study was to determine the inhibitory activity of the alkaloidal fraction of Phaedranassa brevifolia, on the acetylcholinesterase enzymes (ACHE) and butyrylcholinesterase (BuChE), taking into account that Phaedranassa brevifolia is an endemic species of Ecuador belonging to the Amaryllidaceae family. From the crude extract obtained by the dry bulb maceration and crushed in methanol, the extraction of alkaloids was carried out by means of a protocol based on pH changes and the use of organic solvents. The determination of the inhibitory activity was developed in based of the Ellman methodology et al with modifications, using galantamina as a reference compound. Enzymatic inhibition curves were made and from the equation of the obtained line the IC50 was calculated as an average of three individual repetitions, each one in triplicate. In addition, the alkaloids present in the sample were identified through the analysis of Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry, which allowed to show the existence of 11 alkaloids, of which there are 4 unidentified compounds, m/z 303; [M=303], m/z 303; [M=273], m/z 109 (homolycorin-type), m/z 125 (homolycorin-type), with significant abundance in m/z 303; [M=303] (33,49%) and 7 identified, pancratinin C, haemantamine, vittatin/crinin, galantamina and the most abundant within this group is 11-hydroxyvittatin / hamayna (18.80%). The obtained results showed that the alkaloidal extract of Phaedranassa brevifolia presented an IC50 of 3,45±0,29 μg/mL for acetylcholinesterase and an IC50 of 58,89±0,55 μg/mL for butyrylcholinesterase, in reference to galantamina that presents IC50 values of 0,30±0,02 μg/mL for Ache and for BuChe an IC50 of 5,00±0,36 μg/mL. In front of both colinestrases, the alkaloidal extract of Phaedranassa brevifolia shows a high inhibitory activity. Finally, it is recommended to carry out more phytochemical studies and biological activity due to the particular phytochemical profile of the species Phaedranassa brevifolia.
Resumen : El objetivo del presente estudio fue determinar la actividad inhibitoria de la fracción alcaloidal de Phaedranassa brevifolia, sobre las enzimas acetilcolinesterasa (AChE) y butirilcolinesterasa (BuChE), tomando en cuenta que Phaedranassa brevifolia es una especie endémica del Ecuador perteneciente a la familia Amaryllidaceae. A partir del extracto bruto obtenido por maceración del bulbo seco y triturado en metanol, se realizó la extracción de alcaloides mediante un protocolo basado en cambios de pH y uso de solventes orgánicos. La determinación de la actividad inhibitoria fue desarrollada en base a la metodología de Ellman et al con modificaciones, empleando galantamina como compuesto de referencia. Se realizaron curvas de inhibición enzimática y a partir de la ecuación de la recta obtenida se calculó el IC50 como media de tres repeticiones individuales, cada una por triplicado. Además se identificaron los alcaloides presentes en la muestra mediante el análisis de Cromatografía de Gases acoplado a Espectrometría de Masas, lo que permitió evidenciar la existencia de 11 alcaloides, de los cuales existen 4 compuestos no identificados, m/z 303; [M=303], m/z 303, [M=273], m/z 109 (homolycorina-tipo), m/z 125 (homolycorina-tipo), siendo el de abundancia significativa m/z 303; [M=303] (33,49%) y 7 identificados, pancratinina C, haemantamina, vittatina/crinina, galantamina y el más abundante dentro de este grupo es 11-hydroxivittatina/hamayna (18,80%). Los resultados obtenidos mostraron que el extracto alcaloidal de Phaedranassa brevifolia presentó un IC50 de 3,45±0,29 μg/mL para acetilcolinesterasa y un IC50 de 58,89±0,55 μg/mL para butirilcolinesterasa, en referencia a galantamina que presenta valores de IC50 de 0,30±0,02 μg/mL para AChE y para BuChE un IC50 de 5,00±0,36 μg/mL. Frente a ambas colinesterasas, el extracto alcaloidal de Phaedranassa brevifolia presenta una alta actividad inhibitoria. Finalmente, se recomienda realizar más estudios fitoquímicos y de actividad biológica debido al particular perfil fitoquímico que presenta la especie Phaedranassa brevifolia.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/10630
Aparece en las colecciones: Bioquímico/a y Farmacéutico/a

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