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Título : Determinación del potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria viridis sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía.
Autor : Reyes Días, Cinthya Raquel
Director(es): Vinueza Tapia, Diego Renato
Tribunal (Tesis): Pilco Bonilla, Gisela Alexandra
Palabras claves : BIOQUÍMICA;FITOQUÍMICA;AMIRUKA (Psychotria viridis);ALCALOIDE;XANTINA OXIDASA;RADICAL SUPERÓXIDO;AUTOGRAFÍA (MÉTODO)
Fecha de publicación : 16-oct-2019
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Reyes Días, Cinthya Raquel. (2019). Determinación del potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria viridis sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFC;56T00896
Abstract : The objective of this investigation was to determine the inhibitory potential of the isolated alkaloid fraction of Psychotria viridis in the enzyme xanthine oxidase (XO) and the superoxide radical by autograph. To evaluate the enzyme inhibition, different concentrations of the alkaloid fraction (1, 10, 50, 100 ug) dissolved in a mixture of phosphate solution after pH 7.9 and dimethylsulfoxide were used as a solubility improver (0.25%), and XO. Similarly, two methods were used to determine the ability to capture capacity superoxide radicals; the first consists of riboflavin (B2), nitro blue tetrazolium (NBT) and light system, and the second consists of nicotin adenine in dinucleotide reduced (NADH) tetrazolium nitro blue (NBT) and phenazine methosulfate (PMS). The tests were carried out on thin layer chromatography plates, in which the samples were seeded by the dot blot technique. Once positive results were obtained in the previous autographic tests, experiments were carried out on 96-well microplates and a microelisa reader, for the determination of the mean inhibitory concentration (IC50) of the alkaloidal fraction and suitable comparison standards (ascorbic acid, acid gallic acid and allopurinol) both for the enzyme inhibition test, and for the superoxide radical uptake tests. It was established that the alkaloidal fraction of Psychotria viridis does not exhibit a significant inhibitory capacity on XO at the concentrations tested (4-32 ug/mL); however, it shows a very appreciable superoxide radical scavenging capacity, with IC50 values of 0.94±0.064 ug/mL and 16.01±0.14 ug/mL in the B2 / LUZ / NBT and NADH / PMS / NBT systems, respectively; even exceeding the controls tested, ascorbic acid IC50 2.03±0.026 ug/mL and gallic acid IC50 22.6±0.78 ug/mL. The above creates many expectations for further research in the field of the antioxidant potential of the molecules present in the alkaloidal fraction of Psychotria viridis. It is recommended to continue with the studies of structural elucidation.
Resumen : El objetivo de esta investigación fue determinar el potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal aislada a partir de Psychotria viridis sobre la enzima xantina oxidasa (XO) y radical superóxido mediante autografía. Para evaluar la inhibición enzimática se utilizó como sustrato xantina, diferentes concentraciones de la fracción alcaloidal (1, 10, 50, 100 ug) disueltas en una mezcla de solución buffer de fosfato pH 7.9 y dimetilsulfóxido como mejorador de la solubilidad (0.25%), y XO. Similarmente, para determinar la capacidad captadora de radical superóxido se utilizaron dos métodos; el primero consistente en el sistema riboflavina (B2), nitroazul de tetrazolio (NBT) y luz, y el segundo constituido por nicotin adenin dinucleótido reducido (NADH), nitroazul de tetrazolio (NBT) y metosulfato de fenazina (PMS). Las pruebas se llevaron a cabo sobre placas de cromatografía de capa delgada, en las que las muestras fueron sembradas mediante la técnica dot-blot. Una vez obtenidos resultados positivos en las pruebas autográficas precedentes, se realizaron experimentos sobre microplacas de 96 pocillos y un lector de microelisa, para la determinación de la concentración inhibitoria media (IC50) de la fracción alcaloidal y estándares adecuados de comparación (ácido ascórbico, ácido gálico y alopurinol) tanto para la prueba de inhibición enzimática, como para los ensayos de captación de radical superóxido. Se pudo establecer que la fracción alcaloidal de Psychotria viridis no exhibe una capacidad inhibitoria significativa sobre XO a las concentraciones ensayadas (4-32 ug/mL); sin embargo, muestra una muy apreciable capacidad captadora de radical superóxido, con valores de IC50 de 0.94±0.064 ug/mL y 16.01±0.14 ug/mL en los sistemas B2/LUZ/NBT y NADH/PMS/NBT, respectivamente; superando incluso a los controles ensayados, ácido ascórbico IC50 2.03±0.026 ug/mL y ácido gálico IC50 22.61±0.78 ug/mL. Lo anterior origina muchas expectativas para posteriores investigaciones en el campo del potencial antioxidante de las moléculas presentes en la fracción alcaloidal de Psychotria viridis. Se recomienda continuar con los estudios de elucidación estructural.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/13088
Aparece en las colecciones: Bioquímico/a y Farmacéutico/a

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