Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/13445
Título : Determinación del potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria pilosa sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía.
Autor : Machado Valle, Mishell Karolina
Director(es): Vinueza Tapia, Diego Renato
Tribunal (Tesis): Pilco Bonilla, Gisela Alexandra
Palabras claves : BIOQUÍMICA;PRODUCTOS NATURALES;INHIBICIÓN;XANTINA OXIDASA;Psychotria pilosa;ALCALOIDE;ANTIOXIDANTE;RADICAL SUPERÓXIDO;AUTOGRAFÍA (MÉTODO)
Fecha de publicación : 6-dic-2019
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Machado Valle, Mishell Karolina. (2019). Determinación del potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria pilosa sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFC;56T00905
Abstract : The research aimed to determine the inhibitory potential of the alkaloidal fraction of P.pilosa on xanthine oxidase and superoxide radical by autography. The alkaloidal extract of the P. pilosa leaves was obtained from maceration with methanol, after the use of organic solvents (ethyl ether and ethyl acetate) and pH changes, reaching a yield of 0.07%. The study was conducted at different concentrations of the alkaloidal fraction (1, 10, 50, 100 µg) using methanol as solvent. The autographic tests were carried out in 6x4 cm TLC plates, using the "dot blot" technique, approximately 10 µL of each total alkaloid solution was seeded. When evaluating the antioxidant activity of P. pilosa using the DPPH method, ascorbic acid was used as a reference. The models were used to determine the superoxide radical scavenging capacity: riboflavin, light, tetrazolium nitro blue (NBT) and NADH, phenazine methosulfate (PMS), tetrazolium nitro blue (NBT). In both methods, the standard used was taxifolin, while to evaluate the inhibitory potential of xanthine oxidase, xanthine was used as a substrate, and allopurinol was a positive control. Thus, these methods helped discriminate between a pure XO inhibitor and a O_2^(.-) sensor. Thin-layer chromatography (TLC) was carried out using chloroform/triethylamine/ methanol as a mobile phase in proportions (6: 0.5: 0.6) and developed without chemical treatment at 254 nm. Qualitative and quantitative data were reflected in the intensity of the color and diameter of the halos, respectively; The GelAnalyzer program was used to obtain the results of the inhibition areas. The results showed that the P. pilosa alkaloidal fraction has a superoxide radical scavenging capacity for the B2 / light / NBT and NADH / PMS / NBT systems. In contrast, it does not exhibit xanthine oxidase inhibition. It is recommended to conduct studies of structural elucidation of alkaloids using chromatographic and spectroscopic techniques.
Resumen : La investigación tuvo como objetivo determinar el potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de P. pilosa sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía. Se obtuvo el extracto alcaloidal de las hojas de P. pilosa a partir de una maceración con metanol, posterior el uso de solventes orgánicos (éter etílico y acetato de etilo) y cambios de pH, alcanzando un rendimiento de 0.07%. El estudio se realizó a diferentes concentraciones de la fracción alcaloidal (1, 10, 50, 100 µg) usando metanol como disolvente. Las pruebas autográficas se desarrollaron en placas de TLC de 6 x 4 cm, mediante la técnica “dot blot”, se sembraron aproximadamente 10 µL de cada solución de alcaloides totales. Al evaluar la actividad antioxidante de P. pilosa mediante el método DPPH• se utilizó como referencia ácido ascórbico. Para determinar la capacidad captadora de radicales superóxido se emplearon los modelos: riboflavina, luz, nitroazul de tetrazolio (NBT) y NADH, metosulfato de fenazina (PMS), nitroazul de tetrazolio (NBT), en los dos métodos el estándar usado fue taxifolina; mientras que para evaluar el potencial inhibitorio de xantina-oxidasa se usó xantina como sustrato y alopurinol fue el control positivo; es así que estos métodos ayudaron a discriminar entre un inhibidor puro de XO y un captador de O_2^(∙ -). La cromatografía en capa fina (TLC) se llevó a cabo usando como fase móvil cloroformo/ trietilamina/metanol en proporciones (6:0.5:0.6) y revelado sin tratamiento químico a 254 nm. Los datos cualitativos y cuantitativos se reflejaron en la intensidad del color y los diámetros de los halos respectivamente; el programa GelAnalyzer fue usado para obtener los resultados de las áreas de inhibición. Los resultados mostraron que la fracción alcaloidal de P. pilosa posee capacidad captadora de radical superóxido para los sistemas B2/luz/NBT y NADH/PMS/NBT, en contraposición no presenta inhibición de xantina-oxidasa. Se recomienda realizar estudios de elucidación estructural de los alcaloides mediante técnicas cromatográficas y espectroscópicas.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/13445
Aparece en las colecciones: Bioquímico/a y Farmacéutico/a

Ficheros en este ítem:
Fichero Descripción Tamaño Formato  
56T00905.pdf2,87 MBAdobe PDFVista previa
Visualizar/Abrir


Este ítem está sujeto a una licencia Creative Commons Licencia Creative Commons Creative Commons