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Título : Determinación de la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa del extracto de alcaloides de Crinum x amabile.
Autor : Carrasco Ruiz, Angelo Fernando
Director(es): Acosta, Karen
Tribunal (Tesis): Vinueza Tapia, Diego
Palabras claves : BIOQUÍMICA;FITOQUÍMICA;EXTRACTO DE ALCALOIDES;BULBO (Crinum x amabile);AMARYLLIDACEAE;COLINESTERASAS;ACTIVIDAD INHIBITORIA;ALZHEIMER (ENFERMEDAD)
Fecha de publicación : nov-2017
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Carrasco Ruiz, Angelo Fernando. (2017). Determinación de la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa del extracto de alcaloides de Crinum x amabile. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFC;56T00741
Abstract : The present research aimed to determine the inhibitory activity of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE) of the alkaloids extract of the plant species Crinum x amabile, belonging to the family Amaryllidaceae. From the crude extract obtained by maceration in methanol of the dried and crushed bulb, it was used an alkaloid extraction protocol based on changes in pH nd use of organic solvents. The purified extract was analyzed by Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry (GC-MS). The inhibitory activity of AChE and BuChE was determined by the modified method of Ellman, in which the necessary conditions to carry out the analysis were established. In total, 18 alkaloids of Amaryllidaceae were identified, being lycorine the most abundant with a percentage of 44.01%, followed by assoanine with 11.63%; in addition, the presence of galanthamine type alkaloids; and 3 unidentified alkaloids (m/z 287, m/z 315, m/z 280). The enzyme inhibition results of the alkaloid extract were expressed as IC50 values, showing a significant acetylcholinesterase inhibitory activity (IC50 2.24 ± 0.01 μg/mL), a result close to the reference compound galanthamine (IC50 0.27 ± 0.03 μg mL). On the other hand, a weak inhibition of butyrylcholinesterase (IC50 116.59 ± 2.85 μg/mL) was showed, observing less activity than the reference compound (IC50 4.88 ± 0.17 μg/mL). This result evidences a low selectivity of the alkaloids of the extract towards this enzyme. This plant species is considered as a possible candidate for the search for new selective inhibitors of AChE, with a potential use for the treatment of Alzheimer's disease. For this reason, it is recommended to carry out more phytochemical and pharmacological studies of Crinum x amabile.
Resumen : La presente investigación tuvo como objetivo determinar la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa (AChE) y butirilcolinesterasa (BuChE) del extracto de alcaloides de la especie vegetal Crinum x amabile, perteneciente a la familia Amaryllidaceae. A partir del extracto bruto obtenido por maceración en metanol del bulbo seco y triturado, se empleó un protocolo de extracción de alcaloides basado en cambios de pH y uso de solventes orgánicos. El extracto purificado se analizó mediante Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas (CG-EM). La actividad inhibitoria de AChE y BuChE se determinó mediante el método modificado de Ellman, en el cual se establecieron las condiciones necesarias para efectuar el análisis. En total, se identificaron 18 alcaloides de Amaryllidaceae, siendo licorina el más abundante con un porcentaje de 44.01 %, seguido de assoanina con un 11.63 %; además, de la presencia de alcaloides de tipo galantamina; y 3 alcaloides no identificados (m/z 287, m/z 315, m/z 280). Los resultados de inhibición enzimática del extracto de alcaloides se expresaron como valores de IC50, mostrando una actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa significativa (IC50 2.24 ± 0.01 µg/mL), resultado cercano al compuesto de referencia galantamina (IC50 0.27 ± 0.03 µg/mL). Por otra parte, se mostró una débil inhibición de butirilcolinesterasa (IC50 116.59 ± 2.85 µg/mL), observando menos actividad ue el compuesto de referencia (IC50 4.88 ± 0.17 µg/mL); resultado que evidencia una baja selectividad de los alcaloides del extracto hacia esta enzima. Se considera esta especie vegetal como un posible candidato para la búsqueda de nuevos inhibidores selectivos de AChE, con un potencial uso para el tratamiento de la Enfermedad de Alzheimer; por ello, se recomienda la realización de más estudios fitoquímicos y farmacológicos de Crinum x amabile.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/7925
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