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Título : Determinación de la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa del extracto de alcaloides de Phaedranassa dubia.
Autor : Inca Benítez, Silvia Alexandra
Director(es): Acosta, Karen
Tribunal (Tesis): Vinueza Tapia, Diego
Palabras claves : BIOQUÍMICA;FITOQUÍMICA;EXTRACTO DE ALCALOIDES;BULBO (Phaedranassa dubia);ACTIVIDAD INHIBITORIA;COLINESTERASAS;GALANTAMINA;ALZHEIMER (ENFERMEDAD)
Fecha de publicación : nov-2017
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Inca Benítez, Silvia Alexandra. (2017). Determinación de la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa del extracto de alcaloides de Phaedranassa dubia. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFC;56T00742
Abstract : The research aimed to determine the inhibitory activity of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE) of the alkaloids extract from plant species Phaedranassa dubia, belonging to the Amaryllidaceae family. From the gross extract obtained by maceration in methanol of the dry and shredded bulb was used a protocol for extraction of alkaloids based on changes of pH and organic solvents use. Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry (CG-EM) was applied with the objective of identifying the alkaloids present in the bulb of Phaedranassa dubia and determining their respective percentages. (GC-MS). The inhibitory activity was determined on the basis of the modified methology of Ellman et al., using galanthamine as a reference compound. The employed method had to be developed based on the physical, environmental and equipment characteristics of the laboratory used, for the subsequent obtaining the half maximal inhibitory concentration (IC50 ). It was obtained a performance percentage of alkaloids of 0,2%. GC-MS showed a total of 9 identified alkaloids present in the bulb from Phaedranassa dubia being the most representative lycorine (54,10%), assoanine (13,77%), galanthamine (4,54%) and anhydrolycorine (3,71%); in turn 3 unidentified alkaloids (m/z 264, m/z 280, m/z 285) were found. The extract of alkaloids from Phaedranassa dubia showed inhibitory activity of AChE expressed as IC50 of 24,48 ± 0,39 µg/mL, with respect to the reference compound galanthamine whose result was 0,30 ± 0,01 µg/mL. As regards the inhibitory activity of BuChE presented an IC50 of 114,96 ± 4,94 µg/mL, being the value of galanthamine 4,41 ± 0,24 µg/mL. For both cholinesterases inhibitory activity results not exceed reference galanthamine compound and there is evidence of greater affinity of the extract of alkaloids to AChE. It is Recommended phytochemical and pharmacological studies more deep from Phaedranasa dubia of Ecuador, research on this species are scarce.
Resumen : El objetivo de esta investigación fue determinar la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa (AChE) y butirilcolinesterasa (BuChE) del extracto de alcaloides de la especie vegetal Phaedranassa dubia, perteneciente a la familia Amaryllidaceae. A partir del extracto bruto obtenido por maceración en metanol del bulbo seco y triturado, se obtuvo la fracción alcaloidea mediante el empleo de un protocolo de extracción basado en cambios de pH y uso de solventes orgánicos. Se aplicó Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas (CG-EM) con el fin de identificar los alcaloides presentes en el bulbo de Phaedranassa dubia y determinar sus respectivos porcentajes. La evaluación de actividad inhibitoria se realizó en base a la metodología modificada de Ellman et al., usando galantamina como compuesto de referencia. El método empleado tuvo que ser previamente acondicionado en función a las características físicas, ambientales y de equipamiento del laboratorio utilizado, para la posterior obtención de la concentración inhibitoria 50 (IC50). Se obtuvo un porcentaje de rendimiento de alcaloides del 0,2%, la CG-EM mostró un total de 9 alcaloides identificados presentes en el bulbo de Phaedranassa dubia siendo los más representativos licorina (54,10%), assoanina (13,77%), galantamina (4,54%) y anhidrolicorina (3,71%); a su vez se encontraron 3 alcaloides aun no identificados (m/z 264, m/z 280, m/z 285). El extracto de alcaloides de Phaedranassa dubia mostró una actividad inhibitoria sobre AChE expresada como IC50 de 25,48 ± 0,39 µg/mL, en tanto que el compuesto de referencia galantamina exhibió un resultado de 0,30 ± 0,01 µg/mL. En cuanto a la actividad inhibitoria sobre BuChE el extracto de alcaloides totales presentó un IC50 de 114,96 ± 4,94 µg/mL, mientras que el valor para galantamina fue 4,41 ± 0,24 µg/mL. Para ambas colinesterasas los resultados de actividad inhibitoria no superan al compuesto de referencia galantamina y se evidencia mayor afinidad del extracto de alcaloides hacia AChE. Se recomienda realizar estudios fitoquímicos y farmacológicos más profundos de Phaedranassa dubia de Ecuador, ya que las investigaciones sobre esta especie son escasas.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/7927
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