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Título : Evaluación de la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa del extracto alcaloidal de Phaedranassa tunguraguae.
Autor : Montero Valencia, Evelin Joely
Director(es): Acosta, Karen
Tribunal (Tesis): Quispillo, John
Palabras claves : BIOQUÍMICA;FITOQUÍMICA;ALCALOIDES;BULBO (Phaedranassa tunguraguae);INHIBICIÓN ENZIMÁTICA;COLINESTERASAS;ALZHEIMER (ENFERMEDAD);GALANTAMINA
Fecha de publicación : feb-2018
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Montero Valencia, Evelin Joely. (2018). Evaluación de la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa del extracto alcaloidal de Phaedranassa tunguraguae. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFC;56T00762
Abstract : The objective was to evaluate the inhibitory activity of acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase of the alkaloidal extract of the Phaedranassa tunguraguae bulb, an endemic species of Ecuador belonging to the Amaryllidaceae family. From the crude extract obtained by maceration of the bulb with methanol, the extraction of alkaloids was carried out by a method based on pH changes and the use of organic solvents. In addition, alkaloids present in the sample were identified through Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry. In addition, the evaluation of the inhibitory activity of the alkaloidal extract against the enzymes acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase was carried out using the Ellman method with modifications, using galantamine as a reference compound. Enzymatic inhibition curves were made and from the equation of the obtained line the IC50 was calculated as an average of three individual repeats, each in triplicate. In the extract of alkaloids of P. tunguraguae the presence of 15 alkaloids was detected, being identified only 8 of them. Lycorine (46.97%) was the most abundant alkaloid, and the presence of 7 unidentified alkaloids was determined with m/z 109, m/z 275, m/z 228, m/z 240, m/z 284, and m/z 294. The enzymatic inh ibitory activity of alkaloid extract expressed with IC50 (concentration at which 50% inhibition occurs), was for acetylcholinesterase of IC50 11.12 ± 1.87 ug/mL, lower activity compared with galantamine (IC50 0.30 ± 0.01 ug/mL). On the other hand, for butyrylcholinesterase obtained an IC50 of 64.49 ± 1.34 ug/mL, against galantamine IC50 4.31 ± 0.04 ug/mL. These results show that the alkaloid extract of P. tunguraguae has less inhibitory activity than galantamine, but relatively untouchable, showing greater affinity of the alkaloids for AChE. It is recommended to carry out more phytochemical and biological activity studies of the species Phaedranassa tunguraguae.
Resumen : El objetivo fue evaluar la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa del extracto alcaloidal del bulbo de Phaedranassa tunguraguae, especie endémica del Ecuador perteneciente a la familia Amaryllidaceae. A partir del extracto bruto obtenido por maceración del bulbo con metanol, se realizó la extracción de alcaloides mediante un método basado en cambios de pH y uso de solventes orgánicos. Además, se identificaron los alcaloides presentes en la muestra a través de Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas. Complementariamente, se realizó la evaluación de la actividad inhibitoria del extracto alcaloidal frente a las enzimas acetilcolinesterasa y butirilcolinesterasa por el método de Ellman con modificaciones, empleando galantamina como compuesto de referencia. Se realizaron curvas de inhibición enzimática y a partir de la ecuación de la recta obtenida se calculó el IC50 como media de tres repeticiones individuales, cada una por triplicado. En el extracto de alcaloides de P. tunguraguae se detectó la presencia de 15 alcaloides, siendo identificados solo 8 de ellos. Licorina (46,97%) fue el alcaloide más abundante, además se determinó la presencia de 7 alcaloides no identificados con m/z 109, m/z 275, m/z 264, m/z 228, m/z 240, m/z 284, y m/z 294. La actividad inhibitoria enzimática del extracto alcaloidal expresada como IC50 (concentración a la que se produce un 50% de inhibición), fue para acetilcolinesterasa de IC50 11.12 ± 1.87 ug/mL, menor actividad en comparación con galantamina (IC50 0.30 ± 0.01 ug/mL). Por otro lado, para butirilcolinesterasa se obtuvo un IC50 64.49 ± 1.34 µg/mL, frente a galantamina IC50 4.31 ± 0.04 ug/mL. Estos resultados demuestran que el extracto alcaloidal de P. tunguraguae presenta actividad inhibitoria menor a galantamina, pero relativamente destacable, exhibiendo mayor afinidad de los alcaloides por AChE. Se recomienda realizar más estudios fitoquímicos y de actividad biológica de la especie Phaedranassa tunguraguae.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/8826
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