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Title: Determinación de las actividades fotoprotectora, genotóxica y de irritación ocular in vitro del extracto hidroalcohólico de Buddleja incana.
Authors: Samaniego Flores, Valeria Alejandra
metadata.dc.contributor.advisor: Vinueza Tapia, Diego Renato
metadata.dc.contributor.miembrotribunal: Acosta, Karen
Pilco, Gisela
Keywords: BIOQUÍMICA;QUISHUAR (Buddleja incana);EXTRACTO SECO;FOTOPROTECCIÓN;RADIACIÓN UV;FACTOR DE PROTECCIÓN SOLAR (FPS);GENOTÓXICIDAD;IRRITACIÓN OCULAR
Issue Date: May-2018
Publisher: Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citation: Samaniego Flores, Valeria Alejandra. (2018). Determinación de las actividades fotoprotectora, genotóxica y de irritación ocular in vitro del extracto hidroalcohólico de Buddleja incana. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Series/Report no.: UDCTFC;56T00784
Abstract: This dissertation work aims at determining the photoprotective effect in vitro of the hydroalcoholic extract of Buddleja incana leaves at 20, 200 and 2000 ppm of concentration; as well as, complement the study with the genotoxicity and eye irritation tests. Previously, conditioning and control of the crude drug were effectuated. In phytochemical screening, the presence of phenolic compounds and flavonoids was qualitatively revealed. The extract was subjected to physical-chemical tests to standardize it, to then be concentrated in an evaporator followed by lyophilization. The content of flavonoids, phenols and antioxidant capacity were determined by spectrophotometric techniques, as well as the SPF in vitro, through the Mansur equation. The photoprotective activity was checked through the method of cell death induced by exposure of Escherichia coli (ATCC 25922) to ultraviolet radiation, the number of UFC survivors was detected at 30-minute intervals during 3 hours. To verify the ocular irritation in vitro of the extract, the horioallantoic membrane test and its variant that includes trypan blue as an indicator of injury were used. The genotoxicity test in vitro was carried out by submitting the roots of Vicia faba to the extract of B. incana, to observe them under a microscope then and identify dividing cells and those with the presence of micronuclei as indicators of genotoxicity. The results disclose the content of phenols of 27.9 GAE / 100 g lyophilized and flavonoids of 6.5 QE / g. The extract of B. incana presents a photoprotective effect very similar to the controls ethylhelix methoxycinnamate and octyl dimethyl-PABA at the same concentrations when comparing the survival level, employing the Tukey statistical analysis from which it is concluded that there is no significant difference, reaching the bacterial survival until 90 min. The extract shows no signs of neither genotoxicity nor eye irritation at any of the tested concentrations. It is recommended to structurally identify the responsible compounds of the photoprotective activity for its application as new sunscreens.
Description: El objetivo del presente trabajo de titulación fue determinar el efecto fotoprotector in vitro del extracto hidroalcohólico de hojas de Buddleja incana a 20, 200 y 2000 ppm de concentración; así como, complementar el estudio con los ensayos de genotoxicidad e irritación ocular. Previamente, se efectuó el acondicionamiento y control de la droga cruda. En el tamizaje fitoquímico fue revelada cualitativamente la presencia de compuestos fenólicos y flavonoides. El extracto fuesometido a ensayos fisicoquímicos con el fin de estandarizarlo, para luego ser concentrado en un evaporador seguido por liofilización. El contenido de flavonoides, fenoles y capacidad antioxidante fueron determinados mediante técnicas espectrofotométricas, así como el FPS in vitro, por medio de la ecuación de Mansur. La actividad fotoprotectora se comprobó mediante el método de muerte celular inducida por exposición de Escherichia coli (ATCC 25922) a la radiación ultravioleta, el número de UFC sobrevivientes se detectaron en intervalos de 30 minutos durante 3 horas. Para comprobar la irritación ocular in vitro del extracto, se usó la prueba de membrana corioalantoidea y su variante que incluye azul tripán como indicador de lesión. El ensayo de genotoxicidad in vitro fue realizado sometiendo las raíces de Vicia faba al extracto de B. incana, para luego observarlas al microscopio e identificar las células en división y aquellas con presencia de micronúcleos como indicadores de genotoxicidad. Los resultados revelan un contenido de fenoles de 27.9 GAE/100 g liofilizado y de flavonoides de 6.5 QE/g. El extracto de B. incana presenta un efecto fotoprotector muy similar a los controles etilhexil metoxicinamato y octildimetil-PABA a las mismas concentraciones al comparar el nivel de supervivencia, por medio del análisis estadístico de Tukey del que se concluye que no existe diferencia significativa, alcanzando la supervivencia bacteriana hasta los 90 min. El extracto no presenta signos de genotoxicidad ni irritación ocular en ninguna de las concentraciones evaluadas. Se recomienda identificar estructuralmente los compuestos responsables de la actividad fotoprotectora para su aplicación como nuevos filtros solares.
URI: http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/8894
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