Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/14554
Registro completo de metadatos
Campo DC Valor Lengua/Idioma
dc.contributor.advisorPacurucu Reyes, Ana Rafaela-
dc.contributor.authorTandapilco Llumitaxi, Jhonatan Wladimir-
dc.date.accessioned2021-07-22T21:12:23Z-
dc.date.available2021-07-22T21:12:23Z-
dc.date.issued2020-12-23-
dc.identifier.citationTandapilco Llumitaxi, Jhonatan Wladimir. (2020). Aislamiento y caracterización microbiológica, bioquímica y molecular de Agrobacterium Tumefaciens a partir de tejidos vegetales infectados. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.es_ES
dc.identifier.urihttp://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/14554-
dc.descriptionSe trató de obtener cepas salvajes de Agrobacterium tumefaciens patógeno causante de la enfermedad de la agalla de la corona, mediante el aislamiento a partir de tumores de rosas y caracterización por medio de técnicas bioquímicas y moleculares, estableciendo su taxonomía a fin de incorporarlas al cepario de controles positivos del Laboratorio de Identificación Molecular (IDgen). El aislamiento se llevó a cabo en dos etapas empleando muestras de rosas proporcionadas por IDgen: la primera consistió en macerar las muestras e inocularlas directamente en placas con dos tipos de medios semiselectivos, mientras que para la segunda se usó únicamente medio D1 con una etapa previa de enriquecimiento selectivo. Las placas se incubaron a 28 °C durante 3-7 días, y sus aislados se caracterizaron de acuerdo con la morfología macroscópica y tinción Gram; las cepas que correspondieron a bacilos Gram negativos se sometieron a las pruebas bioquímicas de producción de catalasa, oxidasa, sulfuro, motilidad a 28 y 35 °C, aclaramiento ácido, telurito de potasio y 3-cetolactosa. Posteriormente, se realizó una reacción en cadena de la polimerasa con primera específicos para las regiones virD2, ipt y ARNr 23S. De un total de 21 cepas que fueron caracterizadas morfológicamente, 17 resultaron ser bacilos Gram negativos y, tras la caracterización bioquímica, ninguna cepa fue capaz de producir 3-cetolactosa; 9 se sometieron a caracterización molecular, de las cuales solo una (PAT07) presento un amplicón de aproximadamente 750pb con primers virD2 e ipt, esta se amplificó y secuenció con primers universales para el ARNr 16S, determinando un 98.44% de identidad con Pseudomonas putida, bacteria asociada a la agalla coronaria en rosas, de manera que sería adecuado reajustar los criterios de aislamiento y caracterización bacteriana, a fin de impedir el desarrollo de Pseudomonas spp. que interfieran sobre el crecimiento de A. tumefacienses_ES
dc.description.abstractSome pathogen Agrobacterium Tumefaciens wild strains causing crown gall were intended to obtain through the isolation of tumors in roses and its characterization through biochemical and molecular techniques which allow establishing their taxonomy in order to add them to the positive control strain collection at the Laboratory of Molecular Identification (IDgen). The isolation process had two stages and was carried out using roses samples given by IDgen: the first stage had to do with the samples maceration and their direct inoculation into plates with two types of semi-selective media, while for the second stage it was only necessary to use half D1 with a previous stage of selective enrichment. The plates were incubated at 28°C during 3-7 days and their isolates were characterized according to the macroscopic morphology and Gram staining; the strains corresponding to Gram negative bacilli were put under catalase, oxidase, sulfide, motility at 28 and 35°C, acid clearance, potassium tellurium and 3-ketolactose production biochemical tests. Then, it was possible to carry out a chain reaction of polymerase with specific primers for virD2, ipt and ARNr23S regions. From a total of 21 morphologically characterized strains, 17 were Gram negative bacilli and after the biochemical characterization, any of the trains was able to produce 3-ketolactose; 9 were put under molecular characterization; from which, only one (PAT07) reflected an approximate amplicon of 750pb with virD2 and ipt primers, this was amplified and sequenced with universal primers for ARNr 16S, determining an identity of 98.44% for Pseudomonas putida, bacterium which is associated with crown gall in roses, so that it would be appropriate to readjust the isolation criteria as well as the bacterial characterization in order to prevent the development of Pseudomonas spp which interfere the growth of A. tumefaciens.es_ES
dc.language.isospaes_ES
dc.publisherEscuela Superior Politécnica de Chimborazoes_ES
dc.relation.ispartofseriesUDCTFC;236T0522-
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccesses_ES
dc.subjectMEDIO AMBIENTEes_ES
dc.subjectBIOTECNOLOGÍA AMBIENTALes_ES
dc.subjectMICROBIOLOGIA AMBIENTALes_ES
dc.subjectAGALLA DE LA CORONAes_ES
dc.subjectAGROBACTERIUM TUMEFACIENSes_ES
dc.subjectENRIQUECIMIENTO SELECTIVOes_ES
dc.subjectCARACTERIZACIÓN BACTERIANAes_ES
dc.subjectPCR CONVENCIONAL Y MULTIPLEXes_ES
dc.titleAislamiento y caracterización microbiológica, bioquímica y molecular de Agrobacterium Tumefaciens a partir de tejidos vegetales infectadoses_ES
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesises_ES
dc.contributor.miembrotribunalDíaz Heredia, Yolanda Dolores-
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ec/es_ES
Aparece en las colecciones: Ingeniero/a en Biotecnología Ambiental; Ingeniero/a Ambiental

Ficheros en este ítem:
Fichero Descripción Tamaño Formato  
236T0522.pdf1,64 MBAdobe PDFVista previa
Visualizar/Abrir


Este ítem está sujeto a una licencia Creative Commons Licencia Creative Commons Creative Commons