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Título : Aislamiento y caracterización de antagonistas fungosos cultivables, nativos de suelos agrícolas del cantón Santa Cruz parroquia Bellavista de la provincia de Galápagos.
Autor : Del Rosario Romero, María Elena
Director(es): Rivas Figueroa, Fernando José
Tribunal (Tesis): Álvarez Romero, Pablo Israel
Palabras claves : TECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS;AGRONOMÍA;AISLAMIENTO;CARACTERIZACIÓN
Fecha de publicación : 27-may-2022
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Del Rosario Romero, María Elena. (2022). Aislamiento y caracterización de antagonistas fungosos cultivables, nativos de suelos agrícolas del cantón Santa Cruz parroquia Bellavista de la provincia de Galápagos. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFRN;13T01003
Abstract : The objective of this research work was to isolate and characterize culturally, morphologically, and molecularly cultivable antagonistic fungi native to agricultural soils of the Santa Cruz canton, Bellavista parish, Galapagos province. The soil samples corresponded to 8 crops of the Santa Cruz canton (Kale, melon, coffee var. Catimor and var. Típica, tomato, yellow corn, undisturbed forest, and bell pepper). The stock solution was prepared where 27.77 g of soil diluted in 250 mL of water was taken, and three replicates per sample were made, in 4 culture media: potato dextrose agar (PDA), potato dextrose agar amended (PDAE), Rose Bengal (RB) and Selective medium for Trichoderma (TSM), the sowings were conserved at 25°C and were observed characteristics of Trichoderma spp., such as phialides, chlamydospores, and conidia. It was necessary to perform molecular characterization to determine the genus and species. Genomic DNA extraction was performed with the help of the Promega Wizard® Kit, and the DNA polymerase chain amplification (PCR) technique in the Rpb2 program was used for identification. As a result of the eight crops sampled, the one that presented the highest number of isolates was the coffee var. catimor crop with six isolates, followed by the Kale crops with 4, melon 4, and coffee var. Típica 1, tomato 1, yellow corn 4, undisturbed forest 1, and bell pepper 0 isolates. The Trichoderma species obtained were harzianum, lentiforme, breve, andinense, longibrachiatum, and reesei. It was concluded with the obtaining of 21 strains, two clades, and six species in the phylogenetic analysis. In addition, the most appropriate technique for the isolation was the sowing by the dilution method and extension in the plate in the RB culture medium. It is recommended to carry out antagonism tests with the 21 strains of Trichoderma.
Resumen : El objetivo de esta investigación fue aislar y caracterizar cultural, morfológica y molecularmente antagonistas fungosos cultivables, nativos de suelos agrícolas del cantón Santa Cruz, parroquia Bellavista de la provincia de Galápagos. Las muestras de suelo correspondieron a 8 cultivos del Cantón Santa Cruz (cultivo de Kale, melón, café var. Catimor y var. Típica, tomate, maíz amarillo, bosque no intervenido y pimiento), se preparó la solución madre, en donde se tomó 27,77 g de suelo diluido en 250 mL de agua y se procedió a realizar 3 repeticiones por muestra, en 4 medios de cultivo: papa dextrosa agar (PDA), papa dextrosa agar enmendado (PDAE), Rosa de bengala (RB) y Medio selectivo para Trichoderma (TSM), las siembras se conservaron a 25°C y fueron observadas características de Trichoderma spp. como: fiálides, clamidosporas y conidios. Para determinar el género y especie fue necesario realizar la caracterización molecular. Se realizó la extracción del ADN genómico con la ayuda del Kit Promega Wizard® y para la identificación se empleó la técnica de amplificación cadena del ADN polimerasa (PCR) en el programa Rpb2. Como resultado de los 8 cultivos muestreados, el que presentó mayor cantidad de aislados fue el cultivo de café var. catimor con 6 aislados, seguido por los cultivos de Kale con 4, melón 4, Café var. Típica 1, tomate 1, maíz amarillo 4, bosque no intervenido 1 y pimiento 0 aislados, las especies de Trichoderma obtenidas fueron harzianum, lentiforme, breve, andinense, longibrachiatum y reesei. Concluyendo con la obtención de 21 cepas, 2 clados y 6 especies en el análisis filogenético, además que la técnica más apropiada para el aislamiento fue la siembra por el método de dilución y extensión en placa en el medio de cultivo RB. Se sugiere realizar pruebas de antagonismo con las 21 cepas de Trichoderma.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/17221
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