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Título : Caracterización y antagonismo in vitro de bacterias asociadas a frutos de cacao (theobroma cacao l.) en la provincia de Orellana.
Autor : Tenesaca Chullca, Yolanda Beatriz
Director(es): Álvarez Romero, Pablo Israel
Tribunal (Tesis): Erazo Sandoval, Norma Soledad
Palabras claves : CARACTERIZACIÓN;ANTAGONISMO;IN VITRO;BACTERIAS;ASOCIADAS;CACAO (Theobroma cacao L.);ORELLANA (PROVINCIA)
Fecha de publicación : 13-dic-2023
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Tenesaca Chullca, Yolanda Beatriz. (2023). Caracterización y antagonismo in vitro de bacterias asociadas a frutos de cacao (theobroma cacao l.) en la provincia de Orellana. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFRN;13T01133
Abstract : This investigation aimed to study the characterization and in vitro antagonism of bacteria associated with cocoa fruits (Theobroma cacao L.) Orellana province due to the diversity and antagonism potential of bacteria which is unknown. Samples from La Belleza, La Calumeña, INIAP EECA, Bajo Huiruno, Unión Milagreña and Tomebamba were processed. In the cultural characterization, aspects of the different colonies were determined and for the molecular characterization, DNA extraction was carried out using the OMEGA E.Z.N.A ® Bacterial DNA kit. Molecular identification was based on the analysis of 16S rRNA with primers 27f and 1492r and the PCR products were sequenced in the company MACROGEN COREA. For confrontations, the dual seeding technique was used, confronting Moniliophthora roreri as pathogen vs. 12 bacterial strains as antagonists in modified V8 culture medium and KADO 523 medium. The results obtained from the cultural characterization identified colonies with circular or irregular shape; whole, lobed, or wavy edge; flat elevation; white or yellow pigmentation and in molecular characterization they presented seven different genera. In confrontations, the highest percentage of inhibition was obtained by M.roreri of strain C10 from the Loreto canton, bacterium B40 and KADO 523 medium. It is concluded that Bacillus sp, Stenotrophomonas sp, Mammaliicococcus sp, Brucella sp, Achromobacter sp, Sphingobacterium sp and Brachybacterium sp. were present. The genus Bacillus sp is different in some places of Orellana province. Strain C10, Bacillus sp and Bacillus sp on KADO 523 medium were able to combat and limit the growth of the pathogen. It is recommended to use RNA polymerase (rpoB) sequences as an alternative tool for bacterial genotypic identification.
Resumen : Se desconoce la diversidad y el potencial de antagonismo de bacterias asociadas a frutos de cacao (Theobroma cacao L.) en la provincia de Orellana, por lo tanto, el objetivo de la presente investigación fue estudiar la caracterización y antagonismo in vitro de bacterias asociadas a frutos de cacao (Theobroma cacao L.) en la provincia de Orellana. Se procesaron muestras provenientes de las localidades La Belleza, La Calumeña, INIAP EECA, Bajo Huiruno, Unión Milagreña y Tomebamba. En la caracterización cultural se determinó aspectos de las diferentes colonias y para la caracterización molecular, se realizó la extracción de ADN mediante el empleo kit OMEGA E.Z.N.A ® Bacterial DNA, la identificación molecular está basada en el análisis del ARNr 16S con primers 27f y 1492r y los productos de las PCR fueron secuenciados en la empresa MACROGEN COREA. Para confrontaciones se utilizó la técnica de siembra dual enfrentando Moniliophthora roreri como patógeno vs 12 cepas bacterianas como antagonistas en medio de cultivo V8 modificado y medio KADO 523. Los resultados obtenidos de la caracterización cultural se identificó colonias con forma circular o irregular; borde entero, lobulado u ondulado; elevación plana; pigmentación blanca o amarilla y en caracterización molecular presentaron siete géneros diferentes. En confrontaciones el mayor porcentaje de inhibición obtuvieron M.roreri de la cepa C10 del cantón Loreto, la bacteria B40 y el medio KADO 523. En conclusión, se presentaron géneros como: Bacillus sp, Stenotrophomonas sp, Mammaliicoccus sp, Brucella sp, Achromobacter sp, Sphingobacterium sp y Brachybacterium sp. El género Bacillus sp difiere en las diferentes localidades de la provincia de Orellana. La cepa C10, la bacteria Bacillus sp y en medio KADO 523 demostraron ser capaces de combatir y limitar el crecimiento del patógeno. Se recomienda utilizar las secuencias del ARN polimerasa (rpoB) como una herramienta alternativa para la identificación genotípica bacteriana.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/21363
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